蛋白质组学3D解决方案
发现2D看不到的低丰度蛋白!开创蛋白质组学研究的新时代!
随着蛋白质组学研究开展的越来越广泛及深入,传统的研究手段遇到了很大的挑战。一些比较容易发现和研究的高丰度蛋白质被大量报道,而低丰度蛋白质则很难被分离和富集,造成研究的困难。现在,一种全新的研究技术可以通过在液相状态下按等电点分离粗样品,富集低丰度蛋白质,再结合微pH胶条实现3D研究。
研究低丰度蛋白的最有力工具,低丰度蛋白富集仪
MicroRotofor 微型电泳槽是一种制备型等电聚焦(IEF)仪,它可以将溶液中的复杂蛋白样品按等电点不同分开。无论是单独使用还是做为完整蛋白纯化流程的一部分,MicroRotofor微型电泳槽都可以简单、快速、有效地将蛋白从复杂的蛋白混和物中分离和富集出来。使用MicroRotofor 微型电泳槽,等电聚焦(IEF)是在可自由流动的溶液中进行的。因此,每一个组分都可以非常容易地收集得到,甚至可将某些组分再进行分离。液相IEF对于分离那些在凝胶IEF介质中易于沉淀或分离不好的蛋白更有效。而且,在溶液中进行IEF能够让蛋白保持其天然等电点(pI)。最后,因为IEF的pH梯度是通过载体两性电解质产生的,所以用户可以随心所欲地造成任意连续的pH梯度,从而真正通过pI值筛选蛋白样品。
特点 | 优势 |
设计 | |
小量蛋白溶液体积 |
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易于安装 |
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10个组分(200–250 µl/组分) |
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内置Peltier半导体冷却: (2 档:-20°C或-10°C) |
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紧凑的外形 |
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技术 | |
液体分离介质 |
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膜核心 |
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连续pH梯度/建立特定pH值 |
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真空收集 |
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一次性使用的分离腔 |
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可旋转腔体 |
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在蛋白组学研究中,经典的双向凝胶电泳法(2-DE)对碱性蛋白及低丰度蛋白的分离存在技术障碍,但预分离技术的应用可弥补其缺陷。液相等电聚焦可有效地分离富集复杂蛋白样品。碱性胶条用于2-DE可极大地提高蛋白上样量和凝胶分辨率。将上述两种技术相结合用于碱性蛋白质和低丰度蛋白质的分离鉴定,可使碱端区域双向凝胶图谱质量显著提高,蛋白点更清晰且点数增多,质谱鉴定确信度提高,碱性蛋白和低丰度蛋白质谱鉴定成功率提高,对于蛋白组学研究具有一定的意义。
—— 杨芃原,中国人类蛋白质组组织(CHINA-HUPO)副理事长
相关链接:
液相等电聚焦大显神威:
http://www.biosou.com/index_newshow.php?newsid=13257
用液相等电聚焦电泳纯化藻蓝蛋白亚基:
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFD2006-GDXH200606015.htm
液相等电聚焦结合双向凝胶电泳分离碱性蛋白:
http://www.ilib.cn/A-gdxxhxxb200610009.html
人胃癌组织中分子伴侣蛋白的表达及检测:
http://www.wjgnet.com/1009-3079/13/1809.asp
固相干胶条等电聚焦系统
PROTEAN® IEF等电聚焦仪
PROTEAN等电聚焦电泳仪可同时满足高通量实验室或普通用户的需要。它是IEF实验用的专用设备,具有以下特点:
• 高通量电泳平台,可容纳多达24根7cm胶条或12根11cm、17cm、18cm 和 24 cm 胶条
• 半导体冷却平台 ( Peltier-effect ) 精确温控,保证可重复的聚焦结果和更大范围的工作温度 ( 10-25℃ )
• 内置10,000V高压, 2.4mA电流的电源,当达到最高电压时,可更快地达到等电 聚焦所要求的理想伏特小时
• 一次性水化/平衡盘简化了水化胶条转移到聚焦盘的过程,保证残余的样品缓冲液不会通过胶条干扰电流而影响结果
• 有多种聚焦盘和水化/平衡盘可供方便选择;每个盘均能装载1-12根胶条。作为自动化的操作方法可直接在聚焦盘进行水化和等电聚焦过程。为提高实验效率,也可在水化/平衡盘水化胶条的同时,在聚焦盘里聚焦另一组胶条
• 提供预设程序和实时编辑多种方式,最大程度地满足用户的不同需要。基于文本的用户界面,可极简便的编辑程序并允许用户对运行程序进行不断更新
• 可选配热敏打印机,永久记录程序和所运行的数据,运行的数据可通过RS-232 串口传送至电脑中
垂直电泳分离系统
微型PROTEAN Cell系统——世界上最受普遍欢迎的、最方便使用的电泳槽
1. 嵌条天然固定在玻璃板上,省却了分离式嵌条时代的麻烦,且避免了不同厚度的担忧;
2. 平行式和推抐式的组装易如反掌。
3. 兼容预制胶和手灌胶。
4. 玻板、样品梳上均有厚度、孔数的标记,易于识别。
5. 专利的加样导向帮助,不必猜测加样孔的位置。
6. 塑料样品梳不会影响聚合过程,并有防气泡设计。
7. 用转移组件做Western Blotting时,只需1个小时,且所耗缓冲液极少,有内置的冷却器。
PROTEAN II Xi和新型XL垂直板电泳槽
1. 适用于一系列电泳,如SDS-PAGE,双向电泳的一向和二向,Native电泳,制备电泳,梯度电泳及高分辨率核酸琼脂糖电泳。
2. 可同时运行四块胶,多种胶长度选择。
3. 内置冷却芯,可接冷却水,冷却循环池或装入冷却剂,即可消除微笑现象。