发现2D看不到的低丰度蛋白！开创蛋白质组学研究的新时代!

随着蛋白质组学研究开展的越来越广泛及深入，传统的研究手段遇到了很大的挑战。一些比较容易发现和研究的高丰度蛋白质被大量报道，而低丰度蛋白质则很难被分离和富集，造成研究的困难。现在，一种全新的研究技术可以通过在液相状态下按等电点分离粗样品，富集低丰度蛋白质，再结合微pH胶条实现3D研究。

研究低丰度蛋白的最有力工具,低丰度蛋白富集仪

MicroRotofor 微型电泳槽是一种制备型等电聚焦（IEF）仪，它可以将溶液中的复杂蛋白样品按等电点不同分开。无论是单独使用还是做为完整蛋白纯化流程的一部分，MicroRotofor微型电泳槽都可以简单、快速、有效地将蛋白从复杂的蛋白混和物中分离和富集出来。使用MicroRotofor 微型电泳槽，等电聚焦（IEF）是在可自由流动的溶液中进行的。因此，每一个组分都可以非常容易地收集得到，甚至可将某些组分再进行分离。液相IEF对于分离那些在凝胶IEF介质中易于沉淀或分离不好的蛋白更有效。而且，在溶液中进行IEF能够让蛋白保持其天然等电点（pI）。最后，因为IEF的pH梯度是通过载体两性电解质产生的，所以用户可以随心所欲地造成任意连续的pH梯度，从而真正通过pI值筛选蛋白样品。

在蛋白组学研究中，经典的双向凝胶电泳法(2-DE)对碱性蛋白及低丰度蛋白的分离存在技术障碍，但预分离技术的应用可弥补其缺陷。液相等电聚焦可有效地分离富集复杂蛋白样品。碱性胶条用于2-DE可极大地提高蛋白上样量和凝胶分辨率。将上述两种技术相结合用于碱性蛋白质和低丰度蛋白质的分离鉴定，可使碱端区域双向凝胶图谱质量显著提高，蛋白点更清晰且点数增多，质谱鉴定确信度提高，碱性蛋白和低丰度蛋白质谱鉴定成功率提高，对于蛋白组学研究具有一定的意义。

—— 杨芃原，中国人类蛋白质组组织（CHINA-HUPO）副理事长

相关链接：

液相等电聚焦大显神威：

http://www.biosou.com/index_newshow.php?newsid=13257

用液相等电聚焦电泳纯化藻蓝蛋白亚基：

http://www.cnki.com.cn/Article/CJFD2006-GDXH200606015.htm

液相等电聚焦结合双向凝胶电泳分离碱性蛋白：

http://www.ilib.cn/A-gdxxhxxb200610009.html

人胃癌组织中分子伴侣蛋白的表达及检测：

http://www.wjgnet.com/1009-3079/13/1809.asp

固相干胶条等电聚焦系统

PROTEAN® IEF等电聚焦仪

PROTEAN等电聚焦电泳仪可同时满足高通量实验室或普通用户的需要。它是IEF实验用的专用设备，具有以下特点：

        • 高通量电泳平台，可容纳多达24根7cm胶条或12根11cm、17cm、18cm 和 24 cm 胶条

        • 半导体冷却平台 ( Peltier-effect ) 精确温控，保证可重复的聚焦结果和更大范围的工作温度 ( 10-25℃ )

        • 内置10,000V高压, 2.4mA电流的电源，当达到最高电压时，可更快地达到等电 聚焦所要求的理想伏特小时

        • 一次性水化/平衡盘简化了水化胶条转移到聚焦盘的过程，保证残余的样品缓冲液不会通过胶条干扰电流而影响结果

        • 有多种聚焦盘和水化/平衡盘可供方便选择；每个盘均能装载1-12根胶条。作为自动化的操作方法可直接在聚焦盘进行水化和等电聚焦过程。为提高实验效率，也可在水化/平衡盘水化胶条的同时，在聚焦盘里聚焦另一组胶条

        • 提供预设程序和实时编辑多种方式，最大程度地满足用户的不同需要。基于文本的用户界面，可极简便的编辑程序并允许用户对运行程序进行不断更新

        • 可选配热敏打印机，永久记录程序和所运行的数据，运行的数据可通过RS-232 串口传送至电脑中

垂直电泳分离系统

微型PROTEAN  Cell系统——世界上最受普遍欢迎的、最方便使用的电泳槽

        1．  嵌条天然固定在玻璃板上，省却了分离式嵌条时代的麻烦，且避免了不同厚度的担忧；

        2．  平行式和推抐式的组装易如反掌。

        3．  兼容预制胶和手灌胶。

        4．  玻板、样品梳上均有厚度、孔数的标记，易于识别。

        5．  专利的加样导向帮助，不必猜测加样孔的位置。

        6．  塑料样品梳不会影响聚合过程，并有防气泡设计。

        7．  用转移组件做Western Blotting时，只需1个小时，且所耗缓冲液极少，有内置的冷却器。

PROTEAN II Xi和新型XL垂直板电泳槽

        1．  适用于一系列电泳，如SDS-PAGE，双向电泳的一向和二向，Native电泳，制备电泳，梯度电泳及高分辨率核酸琼脂糖电泳。

        2．  可同时运行四块胶，多种胶长度选择。

        3．  内置冷却芯，可接冷却水，冷却循环池或装入冷却剂，即可消除微笑现象。